病毒分离传染性支气管炎病毒可在鸡胚、气管组织和鸡肾细胞培养中生长，初次分离最好在鸡胚中进行。以鸡胚出现侏儒、蜷缩或致死或气管环纤毛运动停止，或细胞出现病变而得到初步确诊，再通过中和试验或电镜技术来验证病原。鸡胚干扰法主要用于鸡传染性支气管炎病毒抗原的鉴定。血清学诊断利用鸡传染性支气管炎病毒特异性抗体来实现对该病毒的检测。实验室常用于鸡传染性支气管炎病毒的血清学诊断方法有：琼脂扩散试验、对流免疫电泳技术、酶联免疫吸附试验、免疫荧光技术、免疫过氧化物酶试验、血凝及血凝抑制试验、病毒中和试验、斑点免疫金测定法、免疫胶体金技术等。鸡传染性支气管炎常用的实验室诊断方法：病毒分离鉴定、琼脂扩散试验、ELISA、血凝试验以及核酸检测技术等。