在温度15~25℃的情况下，空气湿度越大，药液停留在杂草上的时间越长，药液能充分渗透进植物细胞，除草效果越好。因此，打除草剂的最佳时间为早晨8～10点或下午5点以后，尤其是下午6点以后效果最佳，此时温度高、湿度大，药液停留时间长，除草效果好且不易产生药害。有露水时，药液会被稀释，除草效果变差，建议露水稍干后再施药。一般情况下，除草剂适宜的喷施时间为晴天的早上10点之前或下午4点之后，以及阴天（不下雨为前提）的全天时间，这段时间能充分发挥除草剂的药效。
对于春季和夏季播种的作物，如玉米、大豆、花生等，打除草剂时上午和下午均可，但中午温度过高（30多度）不适宜，药液蒸发过快，影响药效。建议选择7-9点或16-19点之间进行，避免太早或太晚，需考虑露水情况。对于秋季或冬季播种的作物，如小麦，打除草剂时应选择接近中午的时间，即10-15点之间。此时温度有所上升，杂草吸收较好，除草效果更佳。